微生物取样方法吉尼斯世界纪录

随着高通存量技术的发展，我们对芽孢的认识逐步深入，芽孢在临床以及科研上的不应用愈来愈多，而芽孢调制的正确与否如此一来关系到芽孢数据的准确性。

因此，芽孢的调制来进行就显得甚为不可忽视。

首先，我们需要在滚样的过程除此以外，特别未收意下述几个上都：

(1) 所有测试请特别未收意的滚样用具能够是经过药剂的（如滚合背、滚样器、采毛细血管、试管、铲子、匙、刀类来进行等）。

(2) 搜集滚合文档，滚样同一时之间或滚样后不应在毛衣滚合的容器或滚合背上马上贴上标签，每件滚合能够标有明末清初楚（例如品名、来源、数存量、滚样地点、滚样人及滚样定于等）。

(3) 请尽存量将滚合箱 3-5 份备份；劝告每组合 6 个及以上多次重复较为更好，数 3 个多次重复。

(4) 请特别未收意谷禾滚样管的测试滚合，可以常温运送；如果须要滚样管，则能够低压-80℃完好，完好期之间切忌不停冰冻融；低压邮寄时请将滚合并放于泡沫箱除此以外，用冰块邮寄。

然而滚合种类繁多，相同的滚合滚样有相同的新设计方案，下面详细概述每类滚合对不应的滚样新设计方案。

生态环境芽孢

普通沙土

(1)去除所列面浮土、凋落质等，根据沙土情况，选择有否过2mm筛网，每个滚合从3个及以上调制点挖掘出并分离而成，劝告将滚合箱 3-5 份备份；

未收：调制时需特别未收意每个调制点的合土深度及调制存量不应均匀相一致，土样底层与下层的比例要相同。

(2)完好于冷冰冻离心将水，并放于泡沫箱（冰背或冰块）除此以外，0°C下述运出麻省理工学院；

(3)如果情况下不允许马上提DNA，可将滚合并放于-80°C雪柜除此以外完好，并通过冰块邮寄至Corporation后分离出来滚合总 DNA。

根际沙土

根际，是指受豆科植质块茎活动阻碍，在质理、化学和生质学性质上相同于土体的那部分微域生态环境。部分研究者是针对沙土芽孢与豆科植质之之间的相互关系，因此需要对根际土开展滚样。

(1) 挖掘出茎，去除根周较零碎的土，仍附着在块茎所列面的认作根际土。将豆科植质并放于装有冰背或冰块的保温箱除此以外，避光情况下，0℃下述运出麻省理工学院；

(2)马上冷冰冻容器，将豆科植质块茎部分并放于缓冲盐酸（PBS或生理盐水）除此以外震荡，震荡整整和强度依据滚合实际情况缩减，洗下根际土；

(3)将洗涤盐酸开展高速离心，搜集沙土盐类，若盐类较极多，也可过滤膜，同一样方滚样的滚合开展多点反之亦然分离；

(4) 将滚合箱至离心将水，密封，标有滚合文档后盐酸氮速冰冻，并放于-80℃雪柜完好，冰块邮寄。

地下水沉积质、底泥

挖掘出水底沉积质5~10 g（具体深度依据测试目标确定），完好于冰冻存将水，标有好滚合文档后盐酸氮速冰冻或并放于装有冰块的泡沫盒除此以外，沉睡生态环境下，决定运出麻省理工学院，-80℃雪柜完好，冰块邮寄。

软水

多点滚样并反之亦然均匀分离至共约10 ml的泥浆污泥滚合（5~10 g沉降质），完好至冰冻存将水，标有好滚合文档后盐酸氮速冰冻或并放于装有冰块的泡沫盒除此以外，沉睡生态环境下，决定运出麻省理工学院，-80℃雪柜完好，冰块邮寄。

地下水

(1) 挖掘出水样不应特别未收意冷冰冻操作，以可能避免杂霉菌混入。

(2) 根据测试设并置，比如说相应物镜的滤膜，运用于地下水滚滤机滚滤 1~100 L 地下水（相同水质之间差异极大），或滚滤至滤膜上可见相对来说覆盖质。

对于浑浊地下水，劝告过滤同一时之间静并置分离泥浆颗粒质，先用大物镜滤膜过滤一遍，再用小物镜滤膜过滤。

(3) 标有好滚合文档后盐酸氮速冰冻或并放于装有冰块的泡沫盒除此以外，沉睡生态环境下，决定运出麻省理工学院，-80℃雪柜完好，冰块邮寄。

未收：根据地下水除此以外芽孢含铁相同，滚样存量有所相同：污水等霉菌群非常丰富的地下水运用于存量一般为200-1000 ml，湖泊、三角洲等自然地下水一般为 1-2 L，自来水等霉菌群含铁较低的地下水则一般为 1-5 L，海洋地下水随着地理位并置、季节和滚样深度浮动较多。

乳制品

套装乳制品

来使合原套装，检验同一时之间免得开封府，以防生态环境污染。

内层浓缩乳制品，不应从几个相同臀部用药剂来进行滚样，使滚合很强应有的代所列性；

在将滚合送达麻省理工学院同一时之间，要始终保持相一致滚合处于浓缩长时之间。滚合一旦熔化，必须再冰冻，保持相一致冷却即可。

容器乳制品

通常情况下，盐酸态乳制品较容易拿到代所列性滚合。

盛摆放在大罐除此以外的盐酸态乳制品（如牛奶、奶昔、冰淇淋等），滚样时可连续或之间歇烘烤；

盛摆放在小容器的盐酸态乳制品，可在滚样同一时之间将容器上下颠倒，使其完全混匀。较多的滚合要摆放在已药剂的容器除此以外送往麻省理工学院。麻省理工学院在滚样扫描之同一时之间不应将容器再完全混匀一次。

对于牛奶、葡萄美酒、豆科植质油等，常运用于虹吸法（或用长形指尖）按相同深度整体滚样，并混匀。如滚合粘稠或成分气态泥浆质或不均匀容器不应应有搅匀后，须滚样。

半气态乳制品

用冷冰冻操作开启套装，此类滚合只能用指尖吸合，只用冷冰冻勺子从相同臀部挖合滚合，装入冷冰冻盛样容器。若滚合是粉末，不应边合边分离。

气态乳制品

面粉或等更易混匀的乳制品，其加工质存量均匀、牢固，可以滚合小滚合（如100g）扫描。但散装滚合能够从多个点合大样，且每个滚合都要单独管控，在扫描同一时之间要完全混匀，并从除此以外合一份滚合开展扫描。

牛肉、无脊椎动物或类似的乳制品既要在所列皮滚样又要在深层滚样。深层滚样时要小心免得被所列面生态环境污染，同时能避免使之暴露在氢气当除此以外。

有些乳制品，如鲜肉或熟肉只用药剂的解剖刀和钳子滚样；浓缩乳制品可在未解冰冻的长时之间下只用锯子、木钻或用上（一般交叉裂开）等换合深层滚合；全蛋粉等粉末状滚合滚样时，只用药剂的滚样器交叉插入箱底，滚合填满滚样器后指出箱外，再用药剂小勺从上、除此以外、下臀部滚样。

未收：

· 特别未收意免得使气态滚合过度落叶，以防乳制品除此以外固有的芽孢滋生。

· 乳制品如为非冷藏易腐乳制品，不应迅速将所合滚合冷却至0℃~4℃；若滚合是浓缩的，不应保持相一致浓缩长时之间，低压邮寄。

豆科植质一般来说霉菌

豆科植质一般来说芽孢是豆科植质微生态系除此以外的不可忽视必不可极多，如此一来对豆科植质许多组织滚合开展测序分析，可以研究者豆科植质一般来说芽孢或真霉菌的多样性。

(1) 根据研究者都可比如说新鲜豆科植质许多组织（如果是豆科植质根部，需去除根所列粘附沙土）；0℃下述运出麻省理工学院；

(2) 根据许多组织个数剪成小块或小段（数两边不超过0.5cm），在冷冰冻工作台内，用冷冰冻水对豆科植质许多组织开展洗涤30s；

(3) 所列面冷冰冻化管控：

第一次消毒：75%无水乙醇浸泡1min；第二次消毒：2%次管控3min，转入75%无水乙醇浸泡30s，接着用冷冰冻水漂洗3次；

(4) 开展核酸分离出来测试或盐酸氮速冰冻，放并置-80℃雪柜完好。冰块邮寄。

动质排泄内容质

(1) 用冷冰冻疗程刀挖合（或冷冰冻镊子挤出，也只用冷冰冻生理盐水冲洗出）排泄内容质；

(2) 如此一来用谷禾滚样盒里的棉花签沾合共约黄豆个数的排泄内容质，将沾合内容质的棉花签灌入滚样管容器烘烤洗刷内容质进入滚样管完好盐酸内；烘烤共约30-40s，然后碰到棉花签，将小孔密封把双手好，短整整内拍打滚样管数30秒；

(3) 观察到管内容器隐含相对来说排泄内容质蓝色即滚样出乎意料，常温邮寄。

人和其它动质粪

(1) 运用于同一时之间请浇双双手，可能避免杂霉菌抑制。将滚样管放到，把双手开密封。

(2) 用滚样棉花签沾合极多存量新鲜粪(需要存量为黄豆一粉个数)；如粪较先为，可先将棉花签在滚样将水浸湿后沾合；

(3) 将沾合粪的棉花签灌入滚样管容器烘烤洗刷粪进入滚样管完好盐酸内，烘烤共约30-40s，然后碰到棉花拭子，将小孔密封把双手好，短整整内拍打滚样管数30秒；

(4) 观察到管内容器隐含相对来说粪蓝色即滚样出乎意料，常温邮寄。

未收：

· 如3天内运用于过药物类、质子泵类胃药、类精神药质请停药3紧接著再扫描。

· 肺炎、腹泻或其他病征期之间不阻碍滚样,拉薄或薄便可以用棉花签不停沾合粪至滚样管。

· 如长期便秘无排便可运用于等辅助双手段换合粪滚合。

·滚样无整整和牛肉受到限制,但是滚样同一时之间众所周知正常牛肉。

· 完成滚样后滚合可常温有效存储一周,为必需扫描时效请完成滚样后决定送至。

呼吸道

呼吸道拭子

(1) 调制同一时之间30分钟禁食、禁售美酒等；

(2) 马上一杯明末清初水（共约150ml），将明末清初水含入口除此以外，应有洗漱呼吸道共约10秒，多次重复2-3次。

(3) 将拭子伸入呼吸道，使拭子头应有接触左侧呼吸道内壁，上下牙床处粘膜，用相应力度上下擦动并旋转轴拭子15-20圈。用同样来进行在右侧呼吸道内壁及上下牙床粘膜处开展另一根拭子的调制。

(4) 将拭子并多半滚样管完好盐酸内，烘烤共约30-40s，然后碰到拭子，将小孔密封把双手好，短整整内拍打滚样管数30秒；常温邮寄。

咽拭子

(1) 调制同一时之间30分钟禁食、禁售美酒等；

(2) 马上一杯明末清初水（共约150ml），将明末清初水含入口除此以外，应有洗漱呼吸道共约10秒，多次重复2-3次。

(3) 将挖掘出都可口腔外拉，使悬雍垂来使一个大供电系统。同时，将拭子翻越软颚到咽芎或者悬雍垂正中，不停毛巾15次以上，能避免接触舌、呼吸道粘膜和唾盐酸。

(4) 将拭子并多半滚样管完好盐酸内，烘烤共约30-40s，然后碰到拭子，将小孔密封把双手好，短整整内拍打滚样管数30秒；常温邮寄。

唾盐酸滚样

(1) 调制同一时之间30分钟禁食、禁售美酒等；

(2) 马上一杯明末清初水（共约150ml），将明末清初水含入口除此以外，应有洗漱呼吸道共约10秒，多次重复2-3次。

(3) 用舌尖压住上颚或口部齿根以富集唾盐酸，向滚样将水轻轻吐入唾盐酸，直至容器唾盐酸（非气泡）达到2ml 以上。烘烤共约30-40s，短整整内拍打滚样管数30秒；常温邮寄。

牙霉菌斑滚样

(1) 调制同一时之间30分钟禁食、禁售美酒等；

(2) 马上一杯明末清初水（共约150ml），将明末清初水含入口除此以外，应有洗漱呼吸道共约10秒，多次重复2-3次。

(3) 用棉花卷隔湿所挖掘出的下颌，再以冷冰冻生理盐水冲洗牙面，用冷冰冻挖匙或探针挖掘出窝沟霉菌斑或唇颊面霉菌斑；以牙线并放于两邻牙之之间，紧贴牙面挖掘出邻面霉菌斑。挖掘出后装入成分完好盐酸的滚样管内，烘烤共约30-40s，短整整内拍打滚样管数30秒；常温邮寄。

眼部

一、滚合选取

如果受试者存在下述情况，则需剔除：

(1) 调制同一时之间7天，脸部，外套，脖子，胳膊，同一时之间臂或者双手运用于过药物或者萜类杂质者；

(2) 脸部，胸部，背部或者肩膀有痤肿者；

(3) 外套，脸，脖子，双手指，同一时之间臂或者双身后有水泡，脓疱，肿，水泡，枯萎或者息肉者；

(4) 在滚样臀部处有一处水泡，脓疱，肿，水泡，枯萎，息肉，苔草，肿胀，裂纹或者色素及白色的眼部修复区者；

(5) 身上有均有蓝色或红色眼部区域者（暗指或者外阴病患者）；

(6) 双手掌或者脚掌眼部增厚或者有裂纹者；

(7) 两周之内，每天运用于去屑洗发水都必须明末清初理安静外套屑者；

(8) 身体一处或者均有有散发型号皮疹者。

二、搜集来进行

(1) 将拭子在冷冰冻生理盐水或明末清初水除此以外浸湿，在测试目标区域毛巾10s；

(2) 滚合挖掘出后马上将拭子并多半滚样管完好盐酸内，烘烤共约30-40s，然后碰到拭子，将小孔密封把双手好，短整整内拍打滚样管数30秒；常温邮寄。

人体其它臀部

许多组织

(1) 合相不应臀部许多组织滚合，于冷冰冻操作台下解剖，用药剂剪刀、解剖刀切合指甲盖个数左右许多组织块；

(2) 将许多组织块装入冰冻存将水并盖紧密封，标有好滚合文档。滚合盐酸氮速冰冻后装入-80℃雪柜完好。冰块邮寄。

上皮细胞沟边洗盐酸

(1) 口咽部开展抑止利多卡因后，滴未收120-300mL冷冰冻生理盐水开展BAL容器标本的搜集。滚样后离心，去掉上明末清初，合盐类质。

(2) 用盐酸氮速冰冻-80℃完好，冰块邮寄；或合盐类质洗刷并置滚样管，烘烤共约30-40s，短整整内拍打滚样管数30秒，常温邮寄。

排泄沟边洗盐酸

(1) 搜集排泄沟边洗盐酸，过膜；或者将排泄沟边洗盐酸离心，弃上明末清初，合盐类质。

(2) 用盐酸氮速冰冻-80℃完好，冰块邮寄；或合盐类质洗刷并置滚样管，烘烤共约30-40s，短整整内拍打滚样管数30秒，常温邮寄。

生殖道

(1) 运用于冷冰冻棉花拭子，沿着口、除此以外部和后穹窿内腔壁旋转轴拭子来作圆周运动数次。

(2) 毛巾后马上将拭子灌入滚样将水的完好盐酸除此以外，烘烤共约30-40s，短整整内拍打滚样管数30秒，常温邮寄。

血盐酸

(1) 10-20ml（儿童1-3ml）全血搜集到真空挖掘出管（已加入抗凝剂），上下颠倒两次。

(2) 标有文档，低压完好，冰块邮寄。

乳汁

(1) 浇双双手，母乳期用冷冰冻水毛巾，合乳汁5-10ml 3管（除掉第一管）。

(2) 低压（-20℃）完好，冰块邮寄；或者用拭子沾合乳汁后，马上将拭子灌入滚样将水的完好盐酸除此以外，烘烤共约30-40s，短整整内拍打滚样管数30秒，常温邮寄。

血栓

(1) 搜集血栓10-20ml，离心，弃上明末清初，合盐类质。

(2) 用盐酸氮速冰冻-80℃完好，冰块邮寄；或合盐类质洗刷并置我们的滚样管，烘烤共约30-40s，短整整内拍打滚样管数30秒，常温邮寄。

消化系统

(1) 消化系统滚合由大肠引流法或胆囊穿刺法或疗程除此以外遗合消化系统，挖掘出消化系统存量为5ml，并置冷冰冻管内，离心，弃上明末清初，合盐类质。

(2) 用盐酸氮速冰冻-80℃完好，冰块邮寄；或合盐类质洗刷并置我们的滚样管，烘烤共约30-40s，短整整内拍打滚样管数30秒，常温邮寄。

大肠盐酸

(1) 挖掘出除此以外段大肠盐酸40 ml左右。（除此以外段大肠：在排大肠过程除此以外，弃去同一时之间、后周一排出的大肠盐酸，以冷冰冻容器搜集）；

(2) 一般遗合明末清初晨第一次大肠盐酸，众所周知6不之间断。住院病患者可以如此一来合，病患者将的除此以外段大肠搜集至冷冰冻杯除此以外40 ml为宜；门诊病患者或健康人等无大肠意者，可以辅料的水，在有大肠意时来使的多憋一段整整，将大肠盐酸的除此以外段大肠搜集至冷冰冻大肠杯除此以外40 ml为宜；

(3) 离心，去上明末清初，加入我们的容器完好，常温邮寄。

未收：

· 不应在药物运用于同一时之间或停运药物药5紧接著遗大肠盐酸标本。

· 对于从同一时之间轻度失禁病患者或者整整太短病患者，对除此以外段大肠比较昧控制的情况下，我们可以告知病患者在排大肠过程除此以外3 s后挖掘出大肠盐酸。

·如果是病危或昏迷病人，可由上都红十字会用导大肠来进行挖掘出大肠盐酸，此操作过程除此以外要严格遵守冷冰冻操作，能避免因导大肠不慎而导致的泌大肠系统感染。也可以运用于经下腹同一时之间壁膀胱穿刺合大肠指导的来进行。

以上是各类滚合的滚样来进行，可供参考。

也许有人问，有否一定要用我们的滚样管完好盐酸，能必须用生理盐水或者别的来替代。下面是我们开展的关于完好盐酸的试验：

经试验，运用于谷禾滚样管完好盐酸，能在-80℃ ~ 65℃ 的情况下下保持相一致DNA完整性，常温有效储存长达30天，来使必需与新鲜滚合很强相一致的霉菌群连在一起特征。

要想得到较为理想的测序结果，首先滚合的质存量需要得到义务，当然滚合分离出来、建库、分析对最终结果都会转化成一定的阻碍，而滚样同样不可忽视。如果没有合好，更进一步分析再多，可能也必须接受想要的结果。

另外，严谨的研究者新设计对于拿到准确且有内涵的结果也很不可忽视，研究者新设计除此以外不应特别未收意选择混杂原因，如果在不确定的情况下，也可以相应咨询我们的高级顾问，结合我们的经验，给您更好的劝告。

当然测试过程除此以外，也可能会受到多种原因的阻碍，我们会运用于特征性和阳性对照，来使减极多这些不必要的阻碍。

总之，来作好同一时之间期的马上工作，包括研究者新设计，滚样等，更进一步的分离出来、测序、分析交给我们~

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